dna聚合酶是可以复制细胞DNA的一种重要作用酶。那dna聚合酶有什么功能呢?dna聚合酶的分类又有哪些呢?相信有许多人都是不知道的,不过没关系,今天小编就来为大家一一解答一下。想知道的朋友不妨就来看一下吧。
dna聚合酶功能
dna聚合酶有哪些功能呢?对于很多人来说,dna聚合酶是陌生的。所以也不会知道dna聚合酶的功能。既然不知道,那下面小编就来为大家解答一下吧。
一、聚合作用
在引物RNA'-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。
酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。dNTP进入结合位点后,可能使酶的构象发生变化,促进3'-OH与5'-PO4结合生成磷酸二酯键。
如果是错误的核苷酸进入结合位点的话,则是不能与模版配对的,因此也无法改变酶的构象而被3'-5'外切酶活性位点所识别并切除之。
二、3'→5'外切酶活性──校对作用
这种酶活性的主要功能是从3'→5'方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸。当反应体系中没有反应底物dNTP时,由于没有聚合作用而出现暂时的游离现象,从而被3'→5'外切酶活性所降解。
如果提高反应体系的温度可以促进这种作用,这表明温度升高使DNA生长链3'末端与模板发生分离的机会更多,因而降解作用加强。
当向反应体系加入dNTP,而且只加放与模板互补的上述核苷酸才会使这种外切酶活性受到抑制,并继续进行DNA的合成。
由以上结论可退出,3'-5'外切酶活性的主要功能就是校队作用,并且当加入核苷酸与模版不互补而游离时,则是会被3'-5'外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸。
在某些T4噬菌体突变株中DNA复制的真实性降低,而易发生突变,从此突变株分离得到的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性很低。
相反,另外一些具有抗突变能力的T4突变株中的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA复制真实性好,变异率低。可见,3'→5'外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。
三、5'→3'外切酶活性──切除修复作用
5'→3'外切酶活性就是从5'→3'方向水解DNA生长链前方的DNA链,主要产生5'-脱氧核苷酸。这种酶活性只对DNA上配对部分(双链)磷酸二酯键有切割活力作用,方向是5'→3'。
每次能切除10个核苷酸,而且DNA的聚合作用能刺激5'→3'外切酶活力达10倍以上。因此,这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。对冈崎片段5'末端RNA引物的去除依赖此种外切酶活性。
胆碱酯酶是什么呢,在我们生活中,想必大家对于胆碱酯酶还是有一定的了解的吧,那么大家知道胆碱酯酶偏高的原因是什么吗,胆碱酯酶偏高怎么办呢,下面就让我们一起来了解一下吧。
胆碱酯酶(CHE)在不同亚型的一种糖蛋白存在于体内。一般可分为乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶。真性胆碱酯酶也称乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase),主要存在于胆碱能神经末梢突触间隙,特别是运动神经终板突触后膜的皱摺中聚集较多;也存在于胆碱能神经元内和红细胞中。此酶对于生理浓度的Ach作用最强,特异性也较高。一个酶分子可水解3×10分子Ach,一般常简称为胆碱酯酶。假性胆碱酯酶广泛存在于神经胶质细胞、血浆、肝、肾、肠中。对Ach的特异性较低,假性胆碱酯酶可水解其他胆碱酯类,如琥珀胆碱。
基本性质
胆碱酯酶蛋白分子表面的活性中心有两个能与乙酰胆碱结合的部位,即带负电荷的阴离子部位和酯解部位。酯解部位含有一个由丝氨酸的羟基构成的酸性作用点和一个由组氨酸咪唑环构成的碱性作用点,两者通过氢键结合,增强了丝氨酸羟基的亲核活性,使之易于与乙酰胆碱结合。
胆碱酯酶水解乙酰胆碱的过程可分为三个步骤
①乙酰胆碱分子结构中带正电荷的季铵阳离子头,以静电引力与胆碱酯酶的阴离子部位相结合;同时乙酰胆碱分子中的羰基碳与胆碱酯酶酯解部位的丝氨酸的羟基以共价键形式结合,形成乙酰胆碱和胆碱酯酶的复合物。
②乙酰胆碱和胆碱乙酰胆碱乙酰胆碱和乙酰胆碱酯酶复合物的裂解。
③乙酰化胆碱酯酶迅速水解,分离出乙酸,酶的活性恢复。
偏高原因
由于胆碱酯酶偏高原因众多,因此对于胆碱酯酶偏高怎么办这个问题,我们也不能一概而论,需要根据患者的病情来决定。这就需要患者进一步做综合检查,找出胆碱酯酶偏高的真正原因,对症用药治疗。最后,医生提醒,对于肝病患者来说,不管是肝功能还是其他检查项目出现异常,都要引起重视,避免病情恶化!
检查意义
人体内存在两种胆碱酯酶,一种是乙酰胆碱酯酶,又称“真性胆碱酯酶”或“特异性胆碱酯酶”主要作用于乙酰胆碱,存在于红细胞及中枢神经系统的灰质中;另一种为血清胆碱酯酶,特异性较差,除可用于乙酰胆碱外,还能作用于其他胆碱酯类,故又称“假性胆碱酯酶”或“非特异性胆碱酯酶”此酶主要由肝脏产生。正常人血清胆碱酯酶用比色法测得含量为130~310单位/升。
由于血清胆碱酯酶是由肝脏合成的,这种酶的活性往往反映了肝脏的损伤。
1、急性病毒性肝炎,患者血清胆碱酯酶降低与病情严重程度有关,与黄疸程度不一定平行,若活力持续降低,常提示预后不良。
2、慢性肝炎,慢性迁延型肝炎患者此酶活力变化不大,慢性活动型肝炎患者此酶活力与急性肝炎患者相似。
3、肝硬化,若处于代偿期,血清胆碱酯酶多为正常,若处于失代偿期,则此酶活力明显下降。
4、亚急性重型肝炎患者特别是肝昏迷病人,血清胆碱酯酶明显降低,且多呈持久性降低。
5、肝外胆道梗阻性黄疸患者,血清胆碱酯酶正常,若伴有胆汁性肝硬化则此酶活力下降。
禁忌症
注意事项
(1)对碘过敏患者,禁用本品,应改用氯解磷定。
(2)老年人的心、肾潜在代偿功能减退,应适当减少用量和减慢静脉注射速度。
(3)有机磷杀虫剂中毒患者越早应用本品越好。皮肤吸收引起中毒的患者,应用本品的同时要脱去被污染的衣服,并用肥皂清洗头发和皮肤。眼部用2.5%碳酸氢钠溶液和生理氯化钠溶液冲洗。
口服中毒患者用2.5%碳酸氢钠溶液彻底洗胃。由于有机磷杀虫剂可在下消化道吸收,因此口服患者应用本品至少要维持48~72小时,以防引起延迟吸收后加重中毒,甚至致死。昏迷患者要保持呼吸道通畅,呼吸抑制应立即进行人工呼吸。
四、焦磷酸解作用
DNApolⅠ的这种活性可以催化3'末端焦磷酸解DNA分子。这种作用就是无机焦磷酸分解DNA生长链,可以认为是DNA聚合作用的逆反应,而且这种水解DNA链作用需要有模板DNA的存在。(dNMP)n+XPPi←(dNMP)n-x+X(dNPPP)→DNA。
五、焦磷酸交换作用
催化dNTP末端的PPi同无机焦磷酸的交换反应。反应式为32P32Pi+dNPPP←dNP32P32P+PPi→DNA。
dna聚合酶共性
[1]以脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)为前体催化合成DNA。
[2]需要模板和引物的存在。
[3]不能起始合成新的DNA链。
[4]催化dNTP加到生长中的DNA链的3'-OH末端。
[5]催化DNA合成的方向是5'→3'。
dna聚合酶分类
(1)依赖DNA的DNA聚合酶。
(2)依赖RNA的DNA聚合酶。
(3)依赖DNA的RNA聚合酶。
(4)依赖RNA的RNA聚合酶。
前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等)。DNA聚合酶只能在有引物的基础上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,这DNA的合成方向记为5′→3′。
换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外,还需要Mg2+、模板DNA和引物,迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。
同样,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶,它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物,并需有DNA模板以及Mn2及Mg2的存在下,在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯键,其新生链的方向也是5′→3′。
RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5条多肽链组成,分别命名为α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。
真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。
聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外,在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。
结语:以上就是小编为大家介绍的有关于dna聚合酶的一些功能以及dna聚合酶的分类。相信大家看完之后对此也是有所了解了。因此,如果你想要了解dna聚合酶的话,则可以多多以上内容哦,相信对你了解dna聚合酶会有所帮助的。